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X-gal (también abreviado BCIG para 5-bromo-4-cloro-3-indolil-β-D-galactopiranósido) es un compuesto orgánico que consiste en galactosa unida a un indol sustituido.El compuesto fue sintetizado por Jerome Horwitz y colaboradores en 1964. El nombre químico formal a menudo se reduce a frases menos precisas pero también menos engorrosas, como bromocloroindoxil galactósido.La X del indoxilo puede ser la fuente de la X en la contracción X-gal.X-gal se usa a menudo en biología molecular para probar la presencia de una enzima, β-galactosidasa, en lugar de su objetivo habitual, un β-galactósido.También se utiliza para detectar la actividad de esta enzima en histoquímica y bacteriología.X-gal es uno de los muchos glucósidos y ésteres de indoxilo que producen compuestos azules insolubles similares al tinte índigo como resultado de la hidrólisis catalizada por enzimas.

X-gal es un análogo de la lactosa y, por lo tanto, puede ser hidrolizado por la enzima β-galactosidasa que escinde el enlace β-glucosídico en la D-lactosa.X-gal, cuando es escindido por β-galactosidasa, produce galactosa y 5-bromo-4-cloro-3-hidroxiindol - 1. Este último luego se dimeriza espontáneamente y se oxida en 5,5'-dibromo-4,4'-dicloro -índigo - 2, un producto de color azul intenso que es insoluble.El propio X-gal es incoloro, por lo que la presencia de un producto de color azul puede utilizarse como prueba de la presencia de β-galactosidasa activa.Esto también permite que la β-galactosidasa bacteriana (llamada lacZ) se use como informador en varias aplicaciones.

En el análisis de dos híbridos, la β-galactosidasa puede usarse como indicador para identificar proteínas que interactúan entre sí.En este método, las bibliotecas genómicas pueden examinarse para la interacción de proteínas utilizando un sistema bacteriano o de levadura.Cuando haya una interacción satisfactoria entre las proteínas que se examinan, dará como resultado la unión de un dominio de activación a un promotor.Si el promotor está ligado a un gen lacZ, la producción de β-galactosidasa, que da como resultado la formación de colonias de pigmento azul en presencia de X-gal, indicará por lo tanto una interacción satisfactoria entre proteínas.Esta técnica puede estar limitada a bibliotecas de cribado de tamaño inferior a 106. La escisión exitosa de X-gal también crea un olor notablemente desagradable debido a la volatilización del indol.

Dado que X-gal en sí es incoloro, la presencia de un producto de color azul puede utilizarse como prueba de la presencia de una β-galactosidasa activa.

Esta fácil identificación de una enzima activa permite utilizar el gen de la βgalactosidasa (el gen lacZ) como gen informador en diversas aplicaciones.