productos

Activadores de anhidrasa carbónica: el primer estudio de activación de la isoforma VI secretora humana con aminoácidos y aminas.

La isoenzima secretora de la anhidrasa carbónica humana (hCA, EC 4.2.1.1), hCA VI, se ha clonado, expresado y purificado en un sistema de expresión bacteriano.Los parámetros cinéticos para la reacción de hidratación con CO(2) demostraron que hCA VI posee un k(cat) de 3,4 x 10(5)s(-1) y k(cat)/K(M) de 4,9 x 10(7)M (-1)s(-1) (a pH 7,5 y 20 grados C).hCA VI tiene una actividad catalítica significativa para la reacción fisiológica, del mismo orden de magnitud que la isoforma ubicua CA I o la isoenzima transmembrana asociada a tumores CA IX.Se demostró que una serie de aminoácidos y aminas actúan como activadores de CA VI, con eficacias variables.l-His, l-Trp y dopamina mostraron efectos activadores débiles de CA VI (K(A)s en el rango de 21-42 microM), mientras que d-His, d-Phe, l-DOPA, l-Trp, serotonina , y algunas piridil-alquilaminas fueron mejores activadores, con K(A)s en el rango de 13-19 microM.Los mejores activadores de CA VI fueron l-Phe, d-DOPA, l-Tyr, 4-amino-l-Phe e histamina, con K(A)s en el rango de 1,23-9,31 microM.Todos estos activadores potencian k(cat), sin tener efecto sobre K(M), participando así en el paso determinante de la velocidad en el ciclo catalítico, las reacciones de transferencia de protones entre el sitio activo de la enzima y el medio ambiente.