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Las células eucariotas contienen un delicado equilibrio de cantidades diminutas de los cuatro desoxirribonucleósidos trifosfatos (dNTP), suficientes solo para unos pocos minutos de replicación del ADN.Tanto una deficiencia como un exceso de un solo dNTP pueden provocar un aumento de las tasas de mutación, reparación defectuosa del ADN o agotamiento del ADN mitocondrial.Los dNTP generalmente se cuantifican mediante un ensayo enzimático en el que la incorporación de dATP radiactivo (o dTTP radiactivo en el ensayo de dATP) en oligonucleótidos sintéticos específicos mediante una polimerasa de ADN es proporcional a la concentración del dNTP desconocido.Encontramos que la ADN polimerasa Klenow de uso común puede sustituir el ribonucleótido correspondiente por el dNTP desconocido, lo que en algunos casos conduce a una gran sobreestimación de los dNTP.Ahora describimos las condiciones de ensayo para cada dNTP que evitan la incorporación de ribonucleótidos.Para los ensayos de dTTP y dATP basta con minimizar las concentraciones de la enzima Klenow y de dATP marcada (o dTTP);para dCTP y dGTP tuvimos que reemplazar la enzima Klenow con la ADN polimerasa Taq o la Thermo Sequenase.Sugerimos que en algunos informes anteriores la incorporación de ribonucleótidos puede haber causado valores demasiado altos para dGTP y dCTP.