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Los PIPES [piperazina-N,N′-bis(ácido 2-etanosulfónico)] se utilizan con frecuencia como agente amortiguador en bioquímica.Es un tampón de ácido etanosulfónico desarrollado por Good et al.en los años 1960.PIPES tiene un pKa cercano al pH fisiológico que lo hace útil en el trabajo de cultivo celular.Se ha documentado que minimiza la pérdida de lípidos al amortiguar la histología de glutaraldehído en tejidos vegetales y animales. Un agente amortiguador con un pKa cercano al pH fisiológico.

El péptido antimicrobiano magainina 2 forma poros en las membranas lipídicas e induce la permeación de la membrana del contenido celular.Aunque esta permeación es probablemente la principal causa de su actividad bactericida, el mecanismo de formación de poros sigue sin comprenderse bien.Por lo tanto, investigamos en detalle la interacción de magainin 2 con membranas lipídicas utilizando vesículas unilaminares gigantes individuales (GUV).La unión de magainina 2 a la membrana lipídica de los GUV aumentó el cambio fraccional en el área de la membrana, δ, que fue proporcional a la concentración superficial de magainina 2, X. Esto indica que la constante de velocidad de la magainina 2 indujo dos -la transición del estado intacto al estado de poro aumentó considerablemente con un aumento en δ.La tensión de una membrana lipídica después de la aspiración de un GUV también activó la formación de poros inducida por magainina 2.Para revelar la ubicación de la magainina 2, se investigó mediante microscopía confocal la interacción de la magainina 2 marcada con carboxifluoresceína (CF) (CF-magainina 2) con GUV individuales que contenían una sonda fluorescente soluble en agua, AF647.En ausencia de tensión debido a la aspiración, después de la interacción de magainin 2, la intensidad de fluorescencia del borde GUV debido a CF-magainin 2 aumentó rápidamente a un valor constante, que permaneció constante durante mucho tiempo, y en 4-32 s antes Al comienzo de la fuga de AF647, la intensidad del borde comenzó a aumentar rápidamente a otro valor constante.Por el contrario, en presencia de la tensión, no se observó ningún aumento en la intensidad del borde justo antes del comienzo de la fuga.Estos resultados indican que la magainina 2 no puede translocarse de la monocapa externa a la interna hasta justo antes de la formación de poros.Con base en estos resultados, concluimos que un poro inducido por magainina 2 es un poro activado por estiramiento y el estiramiento de la monocapa interna es una fuerza impulsora principal de la formación de poros.