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La gravedad de la resistencia microbiana combinada con la falta de nuevos antimicrobianos ha aumentado el interés en el desarrollo de péptidos antimicrobianos (AMP) como nuevos tratamientos.En este estudio, evaluamos las actividades antimicrobianas de dos péptidos sintéticos cortos, a saber, RRIKA y RR.Estos péptidos exhibieron una potente actividad antimicrobiana contra Staphylococcus aureus, y sus efectos antimicrobianos aumentaron significativamente mediante la adición de tres aminoácidos en el extremo C terminal, lo que consecuentemente incrementó la anfipaticidad, la hidrofobicidad y la carga neta.Además, RRIKA y RR demostraron un efecto bactericida significativo y rápido contra aislamientos de Staphylococcus resistentes a fármacos y clínicos, incluidos Staphylococcus aureus resistente a meticilina (MRSA), S. aureus intermedio con vancomicina (VISA), S. aureus resistente a vancomicina (VRSA) , S. aureus resistente a linezolid y Staphylococcus epidermidis resistente a meticilina.A diferencia de muchos AMP naturales, RRIKA y RR mantuvieron su actividad en presencia de concentraciones fisiológicas de NaCl y MgCl2.Tanto RRIKA como RR mejoraron la eliminación de lisostafina en más de 1000 veces y erradicaron los aislamientos de MRSA y VRSA en 20 minutos.Además, los péptidos presentados fueron superiores en la reducción de biopelículas adherentes de S. aureus y S. epidermidis en comparación con los resultados obtenidos con los antibióticos convencionales.Nuestros hallazgos indican que los efectos estafilocidas de nuestros péptidos se produjeron a través de la permeabilización de la membrana bacteriana, lo que provocó la fuga del contenido citoplásmico y la muerte celular.Además, los péptidos no eran tóxicos para las células HeLa en concentraciones de 4 a 8 veces superiores a sus antimicrobianos.Las actividades antimicrobianas potentes e insensibles a la sal de estos péptidos presentan un candidato terapéutico atractivo para el tratamiento de infecciones por S. aureus multirresistentes.