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Quimiofluorescencia: el luminol molecular es una molécula químicamente fluorescente que se puede convertir en ácido aminoftálico en estado excitado en presencia de moléculas de peróxido de hidrógeno, que emite una fuerte fluorescencia.El peróxido de hidrógeno es el producto de muchas reacciones biooxidativas, por lo que es fácil vincular estas reacciones biooxidativas con la fotodetección mediante la introducción de luminol.Por ejemplo, la sonda de glucosa oxidasa/catalasa puede detectar la concentración de peróxido de hidrógeno o glucosa en la muestra y el tiempo de respuesta es de solo 0,5 s (método dinámico).La combinación de sustancias quimioluminiscentes con reacciones inmunológicas y la expresión de la concentración de los componentes inmunitarios detectados mediante reacciones luminosas se denomina tecnología de inmunoensayo quimioluminiscente.En 1976, Shmeder propuso el inmunoensayo de quimioluminiscencia, utilizando luminol-H2O2 y su derivado ABEI como sistema de visualización de la reacción de detección.En la actualidad, el luminol y sus derivados son los marcadores más utilizados en aplicaciones de inmunoensayos de quimioluminiscencia.En condiciones alcalinas, catalizadas por microperoxidasa, se puede liberar una gran cantidad de fotones.Luminol se puede utilizar para WesternBlot de anticuerpos marcados con HRP y detección de hibridación de ácidos nucleicos de sondas marcadas con HRP.También se utiliza en la detección de manchas de sangre de detectives criminales modernos.Un compuesto que pueda usarse como marcador quimioluminiscente debe cumplir las siguientes condiciones: el rendimiento cuántico de luminiscencia es alto;sus propiedades fisicoquímicas coinciden con el sistema en estudio;su reacción luminiscente es el resultado de la reacción de oxidación de la sustancia luminiscente;dentro del rango de concentración utilizado Internamente no tóxico para los organismos vivos.Se utilizan comúnmente varios tipos de reactivos de quimioluminiscencia: éster de acridina, un trazador de quimioluminiscencia ampliamente utilizado, es un compuesto orgánico tricíclico, fácil de oxidar, y la reacción de oxidación no requiere un catalizador y libera fotones a 430 nm;El luminol y el isoluminol y sus derivados son los agentes quimioluminiscentes más maduros.Ya en 1964, mientras se informaba sobre la quimioluminiscencia, se usaban luminol, isoluminol y sus derivados para la quimioluminiscencia.Los inmunoensayos han logrado mejores resultados.Detección de luminiscencia: la longitud de onda de fluorescencia óptima es de 400 nm (detección de quimioluminiscencia en solución de 60 mm K2S2O8, 100 mm K2CO3, pH 11,5)

Quimioluminiscencia: como método de ensayo sensible, la quimioluminiscencia se usa ampliamente para detectar radicales libres y metabolitos de reacción producidos en enzimas, células y organismos biológicos.La luz emitida por sus productos de oxidación y metabolitos se puede utilizar con varios fotómetros.detección.La quimioluminiscencia se usa ampliamente en la detección e investigación de antioxidantes, como polifenoles, polisacáridos, flavonoides y antraquinonas, debido a su sensibilidad, rapidez, operación simple y bajo precio.Los sistemas de quimioluminiscencia comúnmente utilizados para la determinación de aniones superóxido incluyen xantina oxidasa-luminol, pirogalol-luminol y dimetilsulfóxido-luminol.El primero es un sistema enzimático, y los dos últimos es un sistema no enzimático.Los sistemas de quimioluminiscencia para la determinación de radicales hidroxilo incluyen principalmente sulfato de cobre-levadura (o células de la médula ósea)-ácido ascórbico-peróxido de hidrógeno, tampón CuCl-H2O2-o-fenantrolina-carbonato, sulfato de cobre-o-fenantrolina-ácido ascórbico-hidrógeno Los sistemas de quimioluminiscencia de peróxido 5, sulfato ferroso-luminol-peróxido de hidrógeno y sulfato ferroso-luminol, involucran la clásica reacción de Fenton para generar radicales hidroxilo y luego atacan al agente luminiscente para generar quimioluminiscencia, que puede usarse para medir la eliminación de extractos. actividad de los radicales de oxígeno reactivos.Método experimental: utilice el sistema de quimioluminiscencia de pirogalol-luminol: el luminol se convierte en una solución de concentración de 0,05 mol/l con una solución de NaOH de 0,05 mol/l, se almacena en un lugar oscuro y agua destilada dos veces antes de su uso. Diluya a una solución de 1 mmol/l, utilice 1 mmol/ L HCl para hacer una solución de 0,01 mol/L de pirogalol, guárdelo en un refrigerador a 4 °C y dilúyalo con agua bidestilada a 16 veces una solución de 6,25 × 10-4 mol/L antes de usar.Se preparó un tampón de 0,05 mol/l pH 10,2 Na2CO3-NaHCO3 (que contiene 0,1 mmol/LEDTA) antes de su uso y se mezcló con 1 mmol/l de luminol a 2:1 (fracción de volumen) para formar un tampón de luminol y carbonato antes de la mezcla del experimento.Durante la medición, inyecte 10,0 μL de muestras de diferentes concentraciones (0, 0,08, 0,4, 2 y 10 mg/mL) en la celda luminiscente (con el tampón de muestra como control), y luego inyecte 6,25 × 10-4 mol/L de pirogalol 0.05 Finalmente, se adicionó 0.94 mL de una mezcla de tampón de luminol y ácido carbónico para iniciar la reacción (30°C), se contó la intensidad de luminiscencia a intervalos de 2 s, y se midió la intensidad de luminiscencia integrada total a los 300 s.La intensidad de la luminiscencia de fondo fue la luminiscencia cuando no se añadió pirogalol.valor.Además, hay quimioluminiscencia, espectroscopia de fluorescencia y sistema de quimioluminiscencia NBS-diclorofluoresceína para la determinación de la quimioluminiscencia de fluorescencia, etc., su mayor ventaja es la alta sensibilidad.

Propiedades químicas: Polvo cristalino amarillo.Fácilmente soluble en lejía, soluble en ácido diluido, casi insoluble en agua e insoluble en alcohol.Las soluciones neutras o ligeramente ácidas exhiben una fuerte fluorescencia azul brillante cuando se exponen a la luz ultravioleta.Punto de fusión 329-332 ℃

Usos: Como reactivo e indicador de análisis químico.Usar reactivo de detección de análisis de quimioluminiscencia (como determinación de cationes metálicos o sangre)

Usos: Para análisis de quimioluminiscencia, tales como: cationes metálicos, sangre y glucocorticoides

Usos: Prueba de luminiscencia: Emmax440nm (quimioluminiscencia; 60 mmK2S2O8, 100 mmK2CO3, pH11.5; después de agregar H2O2) reactivo e indicador de quimioluminiscencia, comúnmente utilizado en análisis de quimioluminiscencia, como cationes metálicos, inmunidad sanguínea, etc.